Assay kitAssays for ROS and oxidative stress

2023-10-31
조회수 1324


Assays for ROS and oxidative stress


Reactive oxygen species (ROS)

Reactive oxygen species (ROS)는 산소를 포함하는 반응성 화학종 입니다. 여기에는 peroxides, superoxide, hydroxyl radicals, singlet oxygen 및 alpha-oxygen이 포함됩니다.

ROS의 일시적인 특성으로 인해, DCFDA와 같은 형광 염료 기반의 분석을 사용하여 살아있는 세포에서는 쉽게 측정되지만, 조직 및 생체 유체 샘플에서는 측정하기가 더 어려울 수 있습니다.

DCFDA 분석 프로토콜은 DCFDA/H2DCFDA/DCFH-DA/DCFH가 세포로 확산되는 것을 기반으로 합니다. 세포에 유입된 후 세포 에스테라제에 의해 비형광 화합물로 탈아세틸화되고, ROS에 의해 2', 7'-dichlorofluorescein (DCF)으로 산화됩니다. DCF는 형광성이 높으며 485/535nm에서 excitation/emission 되는 형광 분광법에 의해 검출됩니다.


Cat no.Product nameSample typePlatform
ab113851 *DCFDA / H2DCFDA - Cellular ROS Assay Kit  BEST
Adherent cells, Suspension cells
Microplate reader, Flow cytometer, Fluorescence microscope
ab139477Cellular Superoxide Detection Assay Kit
Adherent cells, Suspension cells
Flow cytometer, Fluorescence microscope
ab139476ROS/Superoxide Detection Assay Kit (Cell-based)
Adherent cells, Suspension cells
Flow cytometer, Fluorescence microscope
ab186027Cellular ROS Assay Kit (Red)
Adherent cells, Suspension cells
Microplate reader, Fluorescence microscope
ab186028Cellular ROS Assay Kit (Orange)
Adherent cells, Suspension cells
Microplate reader, Flow cytometer, Fluorescence microscope
ab186029Cellular ROS Assay Kit (Deep Red)
Adherent cells, Suspension cells
Microplate reader, Flow cytometer, Fluorescence microscope
ab139473Cellular ROS/RNS Assay Kit
Adherent cells, Suspension cells
Fluorescence microscope
ab219931Mitochondrial Hydroxyl Radical Detection Assay Kit
Adherent cells, Suspension cells
Microplate reader, Fluorescence microscope
ab219943Mitochondrial Superoxide Assay Kit (Fluorometric)
Adherent cells, Suspension cells
Microplate reader, Fluorescence microscope
ab138874Hydrogen Peroxide Assay Kit (Cell-based)
Adherent cells, Suspension cells
Fluorescence microscope
ab138886Hydrogen Peroxide Assay Kit (Fluorometric - Near Infrared)
Adherent cells, Suspension cells
Microplate reader
ab102500Hydrogen Peroxide Assay Kit
Cell culture media, Cell Lysate, Other biological fluids, Plasma, Serum, Tissue Extracts, Urine
Microplate reader

* 국내 재고 보유 제품


DNA/RNA damage, lipid peroxidation, and protein oxidation/nitration

산화 스트레스 (Oxidative stress)는 ROS를 직접 측정하는 것이 아닌, DNA/RNA 손상, 지질 과산화 (lipid peroxidation), 단백질의 산화/질소화 (protein oxidation/nitration) 수준을 측정함으로써 간접적으로 측정될 수 있습니다. 이러한 산화 스트레스 마커들은 ROS보다 더 오래 지속되는 특성을 가지고 있습니다.


DNA/RNA damage

산화 스트레스의 마커로써 측정할 수 있는 여러 종류의 DNA/RNA 손상이 있습니다. 8-hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG)은 아마도 산화 스트레스를 측정을 위해 가장 일반적으로 사용되는 DNA 손상 마커일 것입니다. Comet assay, apurinic/apyrimidinic site assay, aldehyde-induced damage assay는 산화 스트레스와 관련 있는 DNA 손상을 간접적으로 측정할 수 있습니다.


Lipid peroxidation

Malondialdehyde (MDA)는 가장 흔히 사용되는 산화 스트레스의 지질 마커입니다. MDA는 다중불포화 지방산의 과산화를 통해 형성되며 일반적으로 TBARS assay를 사용하여 정량화됩니다. 그러나 TBARS assay에서는 다른 aldehyde들도 신호를 생성하기 때문에 이 assay는 MDA에 완전히 특이적이지는 않습니다. 그럼에도 불구하고 TBARS assay는 MDA를 측정하기 위해 HPLC를 사용하는 것보다 일반적으로 편리합니다. 또한 MDA를 측정하기 위한 competitive ELISA assay도 수행해볼 수 있습니다. 

다른 지질 과산화의 마커로는 4-HNA, 8-isoprostane, lipid hydroperoxides, oxidized LDL 등이 있습니다.


Protein oxidation/nitration

단백질에 의한 산화 손상은 protein carbonylation과 protein nitration (3-nitrotyrosines)의 형태로 나타날 수 있습니다. ROS는 또한 advanced glycation end products (AGE) 및 advanced oxidation protein products (AOPP)의 형성을 유발할 수 있습니다. 이러한 모든 마커들은 standard assay를 통해 측정할 수 있습니다.


Cat no.Product nameSample typeDetection method
ab2017348-hydroxy 2 deoxyguanosine ELISA Kit
Cell Lysate, Plasma, Saliva, Serum, Tissue Extracts, Urine
Colorimetric
ab133085Lipid Hydroperoxide (LPO) Assay Kit
Cell culture extracts, Plasma, Tissue Extracts
Colorimetric
ab118970 *Lipid Peroxidation (MDA) Assay Kit  BEST
Cell culture extracts, Plasma, Tissue Extracts, Urine
Colorimetric, Fluorometric
ab126287Protein Carbonyl Content Assay Kit
Cell LysateColorimetric
ab211154DNA Damage Assay Kit (AP sites)
DNAColorimetric
ab178020Protein Carbonyl Assay Kit (Western Blot)
Adherent cells, Suspension cells, Tissue Homogenate
Chemiluminescent

* 국내 재고 보유 제품


Antioxidants

항산화 효소 및 다른 환원 분자들은 산화 손상을 일으키는 ROS를 중화합니다. 산화 스트레스 마커로 사용되는 항산화제는 소분자, 효소, 단백질 (예: 알부민)의 세 가지 종류가 있습니다.

소분자 및 단백질의 항산화 능력을 측정하는 방법을 포함하여, 샘플의 총 항산화 능력을 측정하기 위한 여러 분석이 존재합니다. 가장 일반적인 총 항산화 능력 분석 중 하나는 Trolox equivalent antioxidant capacity assay (TEAC) 입니다. Oxygen radical antioxidant capacity assay (ORAC)는 ROS에 의해 생기는 형광을 항산화제가 감소시킴으로써 항산화제의 능력을 측정하는 또 다른 일반적인 산화 스트레스 분석 방법입니다.

또한 항산화 활성은 특정 분석 물질의 양을 측정하여 확인할 수 있습니다. 예를 들어 GSH와 GSSG의 상대적 양을 살펴봄으로써 가능합니다. Glutathione (GSH)은 endogenous 항산화제 중에서 가장 풍부한 분자로 간주되며 산화된 형태인 GSSG를 형성합니다. 이는 glutathione reductase 의해 재활용됩니다.

또는 GST 및 superoxide dismutase와 같은 항산화 효소의 활성 수준을 산화 스트레스 수준과 관련하여 측정할 수 있습니다.


Cat no.Product nameSample typeDetection method
ab65329Total Antioxidant Capacity Assay Kit
Cell culture media, Cell Lysate, Other biological fluids, Plasma, Serum, Tissue Extracts, Urine
Colorimetric
ab234626FRAP Assay Kit (Ferric Reducing Antioxidant Power Assay)
Other biological fluids, Plasma, Serum
Colorimetric
ab65656Ascorbic Acid Assay Kit (Biological Samples)
Cell culture extracts, Cell culture media, Cell culture supernatant, Other biological fluids, Plasma, Serum, Tissue Extracts, Urine
Colorimetric
ab65348 *NAD/NADH Assay Kit
Cell Lysate, Serum, Tissue Lysate, UrineColorimetric
ab176723NAD/NADH Assay Kit
Cell Lysate, Tissue Lysate
Fluorometric
ab65349 *NADP/NADPH Assay KitCell Lysate, Tissue Extracts
Colorimetric
ab176724NADP/NADPH Assay Kit
Cell culture extracts, Tissue Extracts
Fluorometric
ab138881GSH/GSSG Ratio Detection Assay Kit (Green)Cell Lysate, Plasma, Serum, Tissue Extracts, UrineFluorometric
ab205811 *GSH/GSSG Ratio Detection Assay Kit II (Green)
Cell Lysate, Plasma, Tissue Extracts, Urine
Fluorometric
ab112158Free Thiol Assay Kit
Cell culture extracts, Plasma, Urine
Fluorometric
ab219272Total Protein Thiol Assay Kit
Purified proteinColorimetric
ab112132Intracellular glutathione (GSH) Detection Assay Kit
Adherent cells, Suspension cellsFluorometric
ab65325GST Activity Assay Kit
Cell Lysate, Other biological fluids, Plasma, Purified protein, Saliva, Serum, Tissue Lysate, Urine
Fluorometric
ab65326GST Assay Kit
Cell Lysate, Other biological fluids, Plasma, Serum, Tissue Extracts, Urine
Colorimetric
ab65354 *Superoxide Dismutase Activity Assay KitCell culture media, Cell Lysate, Other biological fluids, Plasma, Serum, Tissue Extracts, Urine
Colorimetric
ab83461Glutathione Reductase (GR) Assay KitCell Lysate, Other biological fluids, Plasma, Serum, Tissue Extracts, Urine
Colorimetric
ab102522Xanthine Oxidase Activity Assay Kit
Cell culture extracts, Milk, Other biological fluids, Plasma, Serum, Tissue Extracts, Urine
Colorimetric, Fluorometric
ab102530 *Glutathione Peroxidase Assay Kit
Cell culture supernatant, Other biological fluids, Plasma, Platelets, Serum, Tissue Extracts, Urine
Colorimetric
ab109712Aconitase Activity Assay Kit
Cell culture extracts, Tissue
Colorimetric
ab118184Catalase Activity Assay Kit (Immunocapture)
Cell culture extracts, Tissue ExtractsColorimetric
ab83464 *Catalase Activity Assay Kit
Cell Lysate, Plasma, Serum, Tissue Lysate, Urine
Colorimetric, Fluorometric
ab83463Thioredoxin Reductase Assay Kit
Cell culture extracts, Other biological fluids, Tissue Extracts, UrineColorimetric
ab184867NQO1 Activity Assay Kit
Adherent cells, Cell culture extracts, Cell Lysate, Suspension cells, Tissue Extracts, Tissue Homogenate, Tissue Lysate
Colorimetric
ab155895Peroxidase Activity Assay Kit Cell culture supernatant, Other biological fluids, Plasma, Serum, Urine
Colorimetric, Fluorometric
ab179843
Oxidative Stress Defense (Catalase, SOD1, TRX, smooth muscle Actin) Western Blot Cocktail
Cell Lysate, Tissue Homogenate
Chemiluminescent

* 국내 재고 보유 제품


* 학술 문의   Tel. 031-728-3234, 3237     E-mail. technical@dawinbio.com     카카오톡 플러스 친구 ID: abcam

 

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