Sample 내 단백질 정량이 필요하신가요?
Abcam의 BCA Protein Assay Kit를 사용해 보세요~
제품 특징
- Product name: BCA Protein Assay Kit II
- Cat no. ab287853 (BioVision #K813)
- Sample type: Tissue Extracts, Cell Lysate, Purified protein, Tissue Lysate
- Detection method: Colorimetric (562 nm)
- Range: 25 -2000 ug/ml
단백질 정량 원리
- BCA Protein Assay Kit은 detergent가 있는 경우에도 순수 단백질, 추출물 또는 용해물 내의 총 단백질 농도를 발색 방법으로 측정합니다.
- 이 kit는 알칼리 조건에서 단백질과 함께 제2구리 양이온 (Cu+2) 이 환원되어 생성되는 제1구리 양이온 (Cu+1)과 bicinchoninic acid (BCA)의 킬레이트화를 기반으로 합니다.
- Cu+1-BCA chelate는 수용성 복합체이며 25-2000 ug/ml 사이의 광범위한 단백질 농도에 걸쳐 562 nm에서 강한 흡광도를 나타냅니다.
- 단백질 농도는 일반적으로 사용되는 protein standard (BSA) 를 참조하여 추정됩니다.
Kit 구성품
| Item | Identifier | 2500 tests | 5000 tests |
| BCA Reagent A | NM cap | 500 ml | 2 x 500 ml |
| BCA Reagent B | NM cap | 25 ml | 25 ml |
| BSA Standard (2 mg/ml) | White cap | 5 x 1 ml | 10 x 1 ml |
단백질 정량 protocol
Standard 준비
BSA를 deionized water 또는 단백질 sample에 사용한 것과 같은 sample diluent를 이용해 희석하여 아래 표와 같이 BSA Standard를 준비합니다. 25-2000 pg/ml의 분석 범위 내에서 다른 유사한 희석 방법도 사용될 수 있습니다. 희석된 standard solution은 4°C에서 보관할 때 최대 1주일 동안 사용할 수 있습니다.
| Vial no. | BSA volume (ul) | Diluent volume (ul) | 최종 BSA 농도 (ug/ml) |
| 1 (Stock) | 300 of 2 mg/ml Stock | 0 | 2000 |
| 2 | 300 of 2 mg/ml Stock | 100 | 1500 |
| 3 | 300 of 2 mg/ml Stock | 300 | 1000 |
| 4 | 300 of vial 3 | 300 | 500 |
| 5 | 300 of vial 4 | 300 | 250 |
| 6 | 300 of vial 5 | 300 | 125 |
| 7 | 100 of vial 6 | 400 | 25 |
| 8 (Blank) | 0 | 400 | 0 |
Sample 준비
Water 또는 적절한 diluent를 이용하여, 농도가 분석 범위 (25-2000 ug/ml) 내에 들도록 희석하여 다양한 농도의 sample을 준비합니다. Sample 별로 3가지의 농도로 준비하여 duplicate 또는 triplicate로 실험할 것을 권장합니다.
BCA working reagent 준비
BCA Reagent A와 BCA Reagent B를 50:1 비율로 섞어줍니다. (섞기 시작할 때 녹색 탁도가 관찰되지만, 시약들이 잘 섞이면 이는 사라지고 녹색의 solution이 됩니다.) BCA working reagent는 microplate assay 기준으로 well 당 200 ul씩, test tube assay 기준으로 tube 당 2 ml씩 필요합니다. 모든 BSA Standard 및 sample에 필요한 BCA working reagent를 충분히 준비합니다.
주의: BCA working reagent는 fresh하게 준비할 것을 권장합니다. 그러나 준비된 reagent는 안정적이며, 밀폐된 용기에 넣어 며칠 간 실온에서 보관할 수 있습니다.
Assay protocol
Microplate format
1. Microplate well에 BSA Standard와 단백질 sample을 각각 25 ul씩 넣어줍니다.
2. Standard, sample well에 BCA working reagent를 200 ul씩 넣어준 다음 30초 간 완전히 섞어줍니다.
3. Plate 뚜껑을 닫고 37°C에서 30분 또는 실온에서 2시간 동안 incubation 합니다. Incubation 후, plate를 실온으로 식힙니다.
4. Microplate reader의 흡수 파장을 562 nm로 설정하고 모든 standard와 sample의 흡광도 (OD562)를 측정합니다.
Test tube format
1. 4 ml test tube에 BSA Standard와 단백질 sample을 각각 100 ul씩 넣어줍니다.
2. BCA working reagent를 2 ml씩 넣어준 다음 잘 섞어줍니다.
3. Tube 뚜껑을 닫고 다음 중 하나의 조건으로 incubation 합니다.
- 37°C에서 30분 또는 실온에서 2시간 (Assay range: 25-2000 ug/ml)
- 60°C에서 30분 (Assay range: 5-250 ug/ml)
4. Incubation 후, tube를 실온으로 식힙니다.
5. Spectrophotometer의 흡수 파장을 562 nmㄹ 설정합니다. Water 또는 diluent만을 이용하여 blank를 설정합니다.
6. 모든 standard와 sample의 흡광도 (OD562)를 측정합니다.
Standard curve 예시
Ordering information
| Product | Cat no. | Range | Size |
| BCA Protein Assay Kit II | ab287853 | 25 - 2000 ug/ml | 2500, 5000 tests |  바로 구매
|
| BCA Protein Assay Kit | ab102536 | 0.5 - 30 ug | 1000 tests |
|
| BCA protein assay kit for low concentrations | ab207002 | 0.5 - 40 ug/ml | 2500 tests |
|
| BCA protein assay kit reducing agent compatible (microplate) | ab207003 | 25-2000 ug/ml | 1000 tests |
|
| BCA protein assay kit reducing agent compatible (test tube) | ab207004 | 25-2000 ug/ml | 250 tests |
|
| Bradford Assay Kit | ab102535 | 1) 100 - 500 ug/ml
2) 2.5 - 25 ug/ml | 1000 tests |
|
제품 문의 Tel. 031-728-3234, 3237 E-mail. technical@dawinbio.com 카카오톡 플러스친구 ID: abcam
Sample 내 단백질 정량이 필요하신가요?
Abcam의 BCA Protein Assay Kit를 사용해 보세요~
제품 특징
단백질 정량 원리
Kit 구성품
단백질 정량 protocol
Standard 준비
BSA를 deionized water 또는 단백질 sample에 사용한 것과 같은 sample diluent를 이용해 희석하여 아래 표와 같이 BSA Standard를 준비합니다. 25-2000 pg/ml의 분석 범위 내에서 다른 유사한 희석 방법도 사용될 수 있습니다. 희석된 standard solution은 4°C에서 보관할 때 최대 1주일 동안 사용할 수 있습니다.
Sample 준비
Water 또는 적절한 diluent를 이용하여, 농도가 분석 범위 (25-2000 ug/ml) 내에 들도록 희석하여 다양한 농도의 sample을 준비합니다. Sample 별로 3가지의 농도로 준비하여 duplicate 또는 triplicate로 실험할 것을 권장합니다.
BCA working reagent 준비
BCA Reagent A와 BCA Reagent B를 50:1 비율로 섞어줍니다. (섞기 시작할 때 녹색 탁도가 관찰되지만, 시약들이 잘 섞이면 이는 사라지고 녹색의 solution이 됩니다.) BCA working reagent는 microplate assay 기준으로 well 당 200 ul씩, test tube assay 기준으로 tube 당 2 ml씩 필요합니다. 모든 BSA Standard 및 sample에 필요한 BCA working reagent를 충분히 준비합니다.
주의: BCA working reagent는 fresh하게 준비할 것을 권장합니다. 그러나 준비된 reagent는 안정적이며, 밀폐된 용기에 넣어 며칠 간 실온에서 보관할 수 있습니다.
Assay protocol
Microplate format
1. Microplate well에 BSA Standard와 단백질 sample을 각각 25 ul씩 넣어줍니다.
2. Standard, sample well에 BCA working reagent를 200 ul씩 넣어준 다음 30초 간 완전히 섞어줍니다.
3. Plate 뚜껑을 닫고 37°C에서 30분 또는 실온에서 2시간 동안 incubation 합니다. Incubation 후, plate를 실온으로 식힙니다.
4. Microplate reader의 흡수 파장을 562 nm로 설정하고 모든 standard와 sample의 흡광도 (OD562)를 측정합니다.
Test tube format
1. 4 ml test tube에 BSA Standard와 단백질 sample을 각각 100 ul씩 넣어줍니다.
2. BCA working reagent를 2 ml씩 넣어준 다음 잘 섞어줍니다.
3. Tube 뚜껑을 닫고 다음 중 하나의 조건으로 incubation 합니다.
- 37°C에서 30분 또는 실온에서 2시간 (Assay range: 25-2000 ug/ml)
- 60°C에서 30분 (Assay range: 5-250 ug/ml)
4. Incubation 후, tube를 실온으로 식힙니다.
5. Spectrophotometer의 흡수 파장을 562 nmㄹ 설정합니다. Water 또는 diluent만을 이용하여 blank를 설정합니다.
6. 모든 standard와 sample의 흡광도 (OD562)를 측정합니다.
Standard curve 예시
Ordering information
2) 2.5 - 25 ug/ml
제품 문의 Tel. 031-728-3234, 3237 E-mail. technical@dawinbio.com 카카오톡 플러스친구 ID: abcam