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PerkinElmerNew Kinase assay_LANCE Ultra TR-FRET

2017-07-19

 PerkinElmer R&D 팀에서는 늘 변화하는 연구 트렌드에 발맞춰 
꾸준히 신제품을 개발하고 있습니다. 지난 2년 동안 300개 이상의
신제품을 개발 해 왔고, 현재 진행중입니다.
 최근 주목받고 있는 TR-FRET 기술을 이용한 Kinase assay를 
 소개합니다.







LANCE Assay Principle

LANCE® (Lanthanide chelate excite)와 LANCE® Ultra 제품은 washing 과정이 없고, TR-FRET (time-resolved fluorescence resonance energy transfer) 방식으로 detection을 합니다. 320-340 nm로 빛을 excitation하면 LANCE Europium chelate가 labeling된 donor fluorophore에서 에너지가 FRET (~ 10 nm) 되어 accptor fluorophore인 ULight™ dye를 반응 시킨 후 665 nm에서 빛이 emission 됩니다. 양 쪽 dye 간의 거리가 10 nm 이상일 경우에는 ULight™ dye로 에너지 전달이 안되기 때문에, LANCE Europium dye의 615 nm emission 결과값만 얻을 수 있습니다.

LANCE biomarker detection assay principle


Assay Features

  • 96, 384, 1536 well format
  • Homogeneous assay - Washing 과정 생략, 시료와 시약을 섞은 후 reading (최대 4시간 소요)
  • Sensitive detection
  • Wide dynamic range
  • High reproducibility
  • White plate 사용
  • HTS screening에도 사용
  • Automation으로 전환 용이



LANCE Application

  • Kinase assays
  • cAMP assays
  • Protein:protein interaction assays
  • Epigenetic assays
  • Phosphatase assays
  • Custom labeling and assay



LANCE Ultra Kinase Assays Overview

LANCE® Ultra kinase assay는 cell-free assay로 ULight™-labeled peptide substrate와 근접해 있는 Europium-labeled anti-phospho antibody를 사용합니다. Substrate가 kinase에 의해 phosphorylation (인산화)이 되면 Eu-labeled anti-phospho antibody가 인산화된 site를 인식하게 됩니다. 320 또는 340 nm에서 빛이 excitation되면 Europium donor dye에서 substrate에 labeling 된 ULight™ acceptor dye로 에너지가 전달되고, 그 결과 665 nm에서 빛이 emission 됩니다. Emission intensity는 ULight™ peptide의 인산화 된 정도에 비례한 값을 나타냅니다. 

LANCE Ultra kinase assay는 두 가지 component assay (ULight substrate + Eu-anti-phospho antibody)이기 때문에 빠르게 신제품이 개발되고 있습니다.

lance_ultra_kinase_ASK.jpg





LANCE Ultra Kinase assay 홈페이지 방문

** Kinase selection guide book과 product list는 첨부파일을 다운 받아 볼 수 있습니다.

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