Cell CultureHEK-Blue™ LPS Detection Kit 2

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HEK-Blue™ LPS Detection Kit 2


Lipopolysaccharide(LPS) 는 endotoxin 으로도 알려져 있으며, 그람 음성 박테리아 세포벽의 주요 성분 입니다. LPS는 척추 동물의 선천면역의 강력한 자극제로 열, 패혈성 쇼크를 일으켜 사망에 이르게 할 수 있으며, in vitro 에서는 LPS에 민감한 세포의 경우 실험 결과에 영향을 줄 수 있습니다. 따라서 LPS 존재여부를 모니터링 하는 것은 매우 중요합니다.


현재 endotoxin 검출 방법은 투구게의 혈액을 활용한 Limulus Amebocyte Lysate(LAL) 방법에 의존하고 있습니다. 이 방법의 큰 단점은 분석 억제를 극복해야 하는 부분입니다. HEK-Blue™ LPS Detection Kit 2 는 LAL 테스트를 대체하여 지속적으로 사용 가능한 cell-based colorimetric assay 방식으로, vaccine adjuvant 와 같은 특정 compound 뿐만 아니라 LAL test 의 억제제를 포함하는 모든 biological sample 에서 endotoxin을 검출할 수 있는 빠르고 편리하며 신뢰할 수 있는 방법입니다.


                                                             


HEK-Blue™ LPS Detection Kit 2는 LPS의 검출 및 정량화를 위한 새로운 분석 방법 입니다. Mammalian endotoxin sensor(Beutler B, 2002) 인 TLR4의 활성화를 기반으로, 그람 음성 박테리아 및 lipid A 의 toxic moiety 와 구조적으로 다른 LPS를 인식합니다.


HEK-Blue™-4 세포는 LPS에 민감하게 반응하여 낮은 농도의 LPS(0.01 EU/ml) 도 검출하며, human TLR4와 NF-kB- inducible SEAP reporter 유전자를 안정적으로 발현합니다.

보라색/청색을 생성하는 SEAP(secrted embryonic alkaline phosphatase) 은 QUANTI-Blue™ 를 사용하여 검출하며, NF-kB 활성화를 육안으로 관찰하거나, 620 - 655 nm에서 OD값을 측정하여 정량화 할 수 있습니다.


HEK-Blue-4 Cells

HEK-Blue™-4 세포는 endotoxin sensor cell로써, TLR4 및 TLR4 pathway에서 나온 여러 유전자를 안정적으로 발현하고, NF-κB에 의한 SEAP reporter gene도 동시에 발현 합니다.


HEK-Blue™ Endotoxin Standard

HEK-Blue™ Endotoxin Standard는 FDA 승인 control standard endotoxin(CSE)로 표준화 된 E. coli  055 : B5 LPS 입니다.


 QUANTI-Blue

QUANTI-Blue™ Solution은 SEAP 검출을 위해 고안된 시약입니다. SEAP에 의한 가수분해를 통해 보라색 / 청색을 생성하는 color substrate 를 포함하고 있습니다. QUANTI-Blue™ 는 1ml의 QB reagent와 1ml의 QB buffer로 제공되며, 이것으로 SEAP 검출 시약인 QUANTI-Blue™ 용액 100ml을 만들 수 있습니다.

 

HEK-Blue™ Selection & Normocin

HEK-Blue™ Selection 은 몇 가지 selection용 항생제를 결합한 solution 입니다. 이 항생제는 HEK-Blue™-4 세포에 도입된 다양한 전이유전자(transgenes)의 지속적인 발현을 보장합니다. Normocin™은 mycoplasma, 박테리아 및 곰팡이로 인한 잠재적 미생물 오염으로부터 HEK-Blue™-4 세포를 보호하기 위해 사용합니다.



Specifications

Simple - 기본적인 세포 배양 지식만 필요로 하며, 특정 실험 장비가 필요 없습니다.

Versatile - 거의 모든 생물학적 물질에서 endotoxin level 측정이 가능 합니다.

Highly sensitive - 0.01 EU/ml의 적은 양도 검출 가능 합니다.

Economical - 최대 500개의 샘플을 테스트할 수 있습니다. 

 *시약은 추가로 구매 가능하여, 세포와 함께 지속적으로 사용 할 수 있습니다.


Contents

• 1 vial of HEK-Blue™-4 cells (3-7x106 cells)

8 tubes of 250X HEK-Blue™ Selection (1 ml each)

4 tubes of 500X Normocin™(1 ml each)

1 ml of QB reagent and 1 ml of QB buffer (sufficient to prepare 100 ml of QUANTI-Blue™ Solution, SEAP detection reagent)

2 tubes of HEK-Blue™ Endotoxin Standard (50 EU each)

2 bottles of endotoxin-free water (60 ml)

 Note: Components of the HEK-Blue™ LPS Detection kit can be purchased separately.



Ordering information

    PRODUCTQUANTITYCAT. CODE
HEK-Blue™ LPS Detection Kit 21 kitrep-lps2
HEK-Blue™ Selection10 x 1 mlhb-sel
QUANTI-Blue™ Solution5 mlrep-qbs
HEK-Blue™ Endotoxin Standard10 x 50 EUrep-hbes-10
LPS-RS Ultrapure (R. sphaeroides)1 mgtlrl-prslps


- 본 제품은 LMO 신고가 필요한 세포가 포함되어 있습니다.


[학술문의]  T. 031-728-3236 E. technical@dawinbio.com

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