Reporter Cell LinesInflammasomes

Inflammasomes

NLR (Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor) family 단백질은 선천 면역 반응 조절에 관여합니다. 이러한 단백질은 DAMPs (Damage-associated molecular patterns)라고 알려져 있는 host derived signal 뿐만 아니라, 세포질에서 PAMPs (Pathogen-associated molecular patterns)를 감지합니다.

특정 NLR은 inflammasome으로 불리는 large caspase-1 활성화 복합체 (large caspase-1-activating complexes)의 생성을 유도합니다. Autoproteolytic maturation을 통한 caspase-1의 활성화는 염증성 사이토카인 interleukin-1β (IL-1β)와 IL-18의 분비로 이어집니다. 지금까지 4종류의 inflammasome이 NLR 단백질에 의해 확인되고 정의되었습니다. 4종류의 inflammasome은 아래와 같습니다.

1. NLRP1/ NALP1b inflammasome ],  2. NLRC4/ IPAF inflammasome 3. NLRP3/NALP3 inflammasome , 4. AIM2 (absent in melanoma 2) containing inflammasome 


*아래 그림을 클릭하여 Inflammasome 동영상 세미나를 다운 받으실 수 있습니다. 


IL-1β AND IL-18

IL-1β와 IL-18는 감염, 염증 및 자가 면역 과정 등 다양한 생물학적 영향을 일으키는 cytokine입니다. IL-1β는 발열, 림프구의 활성화, 백혈구 침윤 (leukocyte infiltration)을 촉진하여 감염 및 손상에 대한 전신, 국소 반응에 관여합니다.

IL-18는 IFN-γ 생산을 유도하고 T-helper 1 (Th1) 세포의 polarization에 관여합니다.

Caspase-1에 의해 cleavage되는 IL-1β와 IL-18의 maturation 은 면역 반응을 유도하기 위한 필수 조건입니다. Caspase-1은 비활성 45kDa zymogen (pro-caspase-1)으로 합성되며 적절한 자극에 의해 autocatalytic 과정을 거치게 됩니다. 활성화된 형태의 효소는 subunits p20과 p10을 포함합니다. NLR과 caspase-1을 연결하는 bipartite adapter protein인 ASC (apoptosis-associated speck-like protein containing a carboxy-terminal CARD)의 상호 작용을 통해 Caspase-1은 inflammasome multiprotein complex 내에서 활성화됩니다.


NLRP1 INFLAMMASOME

NLRP1은 caspase-1, caspase-5, ASC 및 triphosphate ribonucleotide로 multimolecular complex 인 inflammsome를 구성합니다.

NLRP1은 NLRP1의 pyrin (PYD) domain을 통해 ASC에 직접 결합하며, NLRP1의 CARD domain을 통해 caspase-1에 직접 결합합니다. NLRP1 inflammasome의 활성은 muramyl dipeptide (MDP) 및 anthrax lethal toxin (mouse NLRP1b)에 의해 유도됩니다. 연구결과에 따르면 in vitro에서 MDP와 anthrax lethal toxin의 감지하기 위해서는 NOD2가 필요한 것으로 보여졌습니다.


NLRC4 INFLAMMASOME

NLRC4 (IPAF)는 NLRC family에서 유일한 inflammasome 구성원으로 알려져 있습니다. NLRC4는 adaptor protein 없이 NLRC4의 CARD domain 와 pro-caspase-1이 결합하고, 강력한 IL-1β 분비를 위해서는 ASC와의 상호 작용이 필요합니다.

NLRC4의 oligomerization은 Salmonella typhimurium, Legionella pneumophila, Shigella flexneri 및 Pseudomonas aeruginosa 와 같은 다양한 박테리아의 cytosolic flagellin 혹은 박테리아 분비 시스템 (type III와 type IV)에 의해 전달될 수 있는 다른 자극에 의해 촉진됩니다.

NLR 계열의 또 다른 구성원인 NAIP5는 특정 상황에서 ligand의 감지에 관여하는 것으로 보입니다. 

Flagellin은 TLR5와 NLRC4 inflammasome를 모두를 촉진시키는 흥미로운 ligand 입니다. 따라서 flagellin는 cytokine의 생성을 독립적으로 신호하고, caspase-1을 통해 maturation을 할 수 있게 합니다.


NLRP3 INFLAMMASOME

NLRP3 inflammasome은 inflammasome 중에서 가장 많이 연구되었습니다.

대식세포에서의 NLRP3 inflammasome의 활성화는 세포가 ATP에 노출된 조건에서, liposaccharide, peptidoglycan, 및 bacterial nucleic acids 같은 다수의 PAMP를 통해 일어날 수 있습니다 실제로, ATP가없는 경우 LPS로 자극 된 대식세포는 많은 양의 pro-IL-1β를 생성하지만, mature cytokine은 거의 방출하지 않습니다. ATP 와 nigericin, maitotoxin과 같은 특정 박테리아 독소는 세포 내 이온 성분의 변화를 일으켜 NLRP3 inflammasome의 활성화를 유도합니다. ATP의 효과는 pannexin과 함께 purinergic P2X7 수용체에 의해 매개되며, 활성화 될 때 cytosol에서 칼륨이 빠르게 유출됩니다.


Inflammasome related prudcts

IL-1β/IL-18 Sensor Cells

ProductDescriptionQtyCat no.
HEK-Blue™ IL-1β CellsHEK 293 reporter cells for human and murine IL-1β cytokines3-7 x 10e6 cells hkb-il1b
HEK-Blue™ IL-18 cells Human & Mouse IL-18 Reporter Cells3-7 x 10e6 cells hkb-hmil18
HEK-Blue™ IL-1R cellsHEK 293 reporter cells for human and murine IL-1α & IL-1β cytokines3-7 x 10e6 cells hkb-il1r


Inflammasome Test Cells

ProductDescriptionQtyCat no.
KO/KD/OE cells
THP1-KO-NLRP3 cells NLRP3 Knockout in THP-1 cells (human monocytes)3-7 x 10e6 cells thp-konlrp3z
THP1-defNLRP3 cellsNLRP3 Knockdown in THP-1 cells (human monocytes)3-7 x 10e6 cells thp-dnlp
THP1-KO-ASC cellsASC Knockout in THP-1 cells (human monocytes)3-7 x 10e6 cells thp-koascz
THP1-defASC cells ASC Knockdown in THP-1 cells (human monocytes)3-7 x 10e6 cells thp-koascz
THP1-KO-CASP4 cells CASP4 Knockout in THP-1 cells (human monocytes)3-7 x 10e6 cells thp-kocasp4z
THP1-KO-GSDMD cells GSDMD Knockout in THP-1 cells (human monocytes)3-7 x 10e6 cells thp-kogsdmdz
RAW-ASC KO-GSDMD cells GSDMD Knockout & ASC expressing RAW 264.7 cells (murine macrophages)3-7 x 10e6 cells raw-kogsdmd
RAW-ASC KO-CASP11 cells Caspase-11 Knockout & ASC expressing RAW 264.7 cells (murine macrophages)3-7 x 10e6 cells raw-kocasp11
THP1-defCASP1 cells Human THP-1 Monocytes - caspase-1 deficient3-7 x 10e6 cells thp-dcasp1
THP1-NLRC4 CellsNLRC4 inflammasome test cell line3-7 x 10e6 cells thp-nlrc4
Reporter cells
THP1-ASC-GFP cellsHuman THP-1 Monocytes - ASC speck reporter cells3-7 x 10e6 cells thp-ascgfp
THP1-HMGB1-Lucia™ CellsPyroptosis and necroptosis reporter monocytes 3-7 x 10e6 cells thp-gb1lc
Parental cells
THP1-Null CellsPositive control cell line for inflammasome studies3-7 x 10e6 cells thp-null
THP1-Null2 CellsPositive control cell line for inflammasome studies3-7 x 10e6 cells thp-nullz
RAW-ASC cellsASC expressing RAW 264.7 cells (murine macrophages)3-7 x 10e6 cells raw-asc


NLRC4 Reporter Assay

ProductDescriptionQtyCat no.
THP1-NLRC4 CellsNLRC4 inflammasome test cell line3-7 x 10e6 cells thp-nlrc4
HEK-Blue™ KD-TLR5 cellsTLR5 deficient - IL1-β SEAP reporter HEK293 cells3-7 x 10e6 cells hkb-kdtlr5


Inflammasome Inhibitors

ProductDescriptionQtyCat no.
NLRP3 inflammasome inhibitor
MCC950NLRP3 inflammasome inhibitor10 mg inh-mcc
GlybenclamideNLRP3 inflammasome inhibitor - Proton pump inhibitor1 g tlrl-gly
Caspase inhibitors
Ac-YVAD-cmkCaspase-1 inhibitor5 mg inh-yvad
VX-765 Caspase-1 and Caspase-4 inhibitor10 mg inh-vx765i-1
50 mg inh-vx765i-5
Z-VAD-FMK Caspase inhibitor1 mg tlrl-vad
Multi-target inhibitors
BAY 11-7082IκB-α inhibitor - NLRP3 inflammasome inhibitor10 mg tlrl-b82
IsoliquiritigeninIκB-α inhibitor - NLRP3 inflammasome inhibitor10 mg inh-ilg
ParthenolideCaspase-1 and inflammasome inhibitor50 mg inh-ptd


Inflammasome Genes

ProductDescriptionQtyCat no.
pUNO1-hASCapUNO1 bearing the human ASC gene, isoform 1 (long)20 µg puno1-hasca
pUNO1-hASC-DNpUNO1 bearing a dominant negative version of the human ASC gene20 µg puno1-hasc-dn
pUNO1-mASCpUNO1 bearing the mouse ASC gene20 µg puno1-masc
pUNO1-mASC-DNpUNO1 bearing a dominant negative version of the mouse ASC gene20 µg puno1-masc-dn
pSELECT-hASC-GFPhASC::GFP fusion gene20 µg psetz-hascgfp
pSELECT-mASC-GFPmASC::GFP fusion gene20 µg psetz-mascgfp
pUNO1-hCASP1apUNO1 bearing the human CASP1 gene, isoform alpha20 µg puno1-hcasp1
pUNO1-mCASP1pUNO1 bearing the mouse CASP1 gene20 µg puno1-mcasp1
pUNO1-hGSDMApUNO1 bearing the human GSDMA gene20 µg puno1-hgsdma
pUNO1-mGSDMApUNO1 bearing the mouse GSDMA gene 20 µg puno1-mgsdma
pUNO1-hGSDMBcpUNO1 bearing the human GSDMB gene, isoform 3 (GenBank) / 4 (UniProt)20 µg puno1-hgsdmb
pUNO1-hGSDMCpUNO1 bearing the human GSDMC gene20 µgpuno1-hgsdmc
pUNO1-hGSDMDpUNO1 bearing the human GSDMD gene20 µgpuno1-hgsdmd
pUNO1-hGSDMD-Flag3xpUNO1 bearing the human GSDMD::Flag3x gene20 µg
pUNO1-mGSDMDpUNO1 bearing the mouse GSDMD gene20 µgpuno1-mgsdmd
pUNO1-hGSDMEapUNO1 bearing the human GSDME gene, isoform 120 µgpuno1-hgsdme
pUNO1-mGSDMEpUNO1 bearing the mouse GSDME gene20 µgpuno1-mgsdme
pUNO1-mPJVKpUNO1 bearing the mouse GSDMF (PJVK) gene20 µg puno1-mgsdmf
pUNO1-hHMGB1pUNO1 bearing the human HMGB1 gene20 µg puno1-hhmgb1
pUNO1-hHMGB1(s)pUNO1 bearing a modified (secretable) human HMGB1 gene20 µg puno1-hhmgb1-s
pUNO1-mHMGB1pUNO1 bearing the mouse HMGB1 gene20 µg puno1-mhmgb1
pSELECT-hHMGB1-LuciahHMGB1::Lucia fusion gene20 µg psetz-hhmgbluc
pSELECT-mHMGB1-LuciamHMGB1::Lucia fusion gene20 µg psetz-mhmgbluc
pUNO1-hCARD12pUNO1 bearing the human NLRC4 (CARD12) gene20 µg puno1-hcard12
pUNO1-hNALP3a
pUNO1 bearing the human NALP3 (NLRC3) gene, isoform 1
20 µg puno1-hnalp3
pUNO1-mNALP3pUNO1 bearing the mouse NALP3 (NLRP3) gene20 µg puno1-mnalp3
pUNO1-mNALP3-HA3xpUNO1 bearing the mouse NALP3-HA (NLRP3-HA) gene20 µg puno1ha-mnalp3


Inflammasome Inducers

ProductDescriptionQtyCat no.
Canonical Inflammasome Inducers - NLRP3 Inflammasome
AlumAluminium hydroxide; NLRP3 inflammasome inducer500 µl tlrl-aloh
ATPAdenosine 5'-triphosphate disodium salt1 g tlrl-atpl
CPPD CrystalsCalcium pyrophosphate dihydrate crystals5 mg tlrl-cppd
HemozoinSynthetic heme crystal5 mg tlrl-hz
MSU CrystalsMonosodium Urate Crystals5 mg tlrl-msu
25 mgtlrl-msu-25
Nano-SiO2SiO2 nanoparticles; NLRP3 inflammasome inducer20 mg (2 x 10 mg) tlrl-sio-2
NigericinNigericin, sodium salt10 mg tlrl-nig
50 mgtlrl-nig-5
TDBMincle Agonist - Synthetic analog of the cord factor2 mg tlrl-tdb
Canonical Inflammasome Inducers - AIM2 Inflammasome
Poly(dA:dT) Naked dsDNA naked200 µg tlrl-patn
1 mgtlrl-patn-1
Poly(dA:dT)/LyoVec™dsDNA naked - complexed with transfection reagent100 µg tlrl-patc
Canonical Inflammasome Inducers - NLRC4 Inflammasome
FLA-PA UltrapureTLR5 Agonist - Flagellin from P. aeruginosa50 µg tlrl-pafla
FLA-ST UltrapureUltrapure flagellin from S. typhimurium50 µg tlrl-epstfla-5
10 µgtlrl-epstfla
FLA-STStandard flagellin from S. typhimurium100 µg tlrl-stfla
Canonical Inflammasome Inducers - NLRP1 Inflammasome
L18-MDPMDP with a C18 fatty acid chain1 mg tlrl-lmdp
MDPMuramyldipeptide (L-D isoform, active)5 mg tlrl-mdp
Non-canonical Inflammasome Inducers
E. coli OMVs Escherichia coli outer membrane vesicles (OMVs)100 µg tlrl-omv-1
E. coli OMVs InvivoFit™InvivoFit™ Escherichia coli outer membrane vesicles (OMVs)500 µg tlrl-omv
CurdlanBeta-1,3-glucan from Alcaligenes faecalis 1 g tlrl-curd
HKCAHeat-killed C. albicans10e9 cells tlrl-hkca
PustulanDectin-1 Agonist - Beta-glucan from Lasallia pustulata100 mg tlrl-pst
Zymosan DepletedHot alkali treated zymosan10 mg tlrl-zyd


Inflammasome Primers

ProductDescriptionQtyCat no.
LPS-EB Standard LPS, E. coli 0111:B45 mg tlrl-eblps
LPS-EB UltrapureUltrapure LPS, E. coli 0111:B45 x 10e6 EU tlrl-3pelps
Pam3CSK4Synthetic triacylated lipopeptide; TLR2/TLR1 agonist1 mgtlrl-pms
Poly(I:C) HMWLong synthetic analog of dsRNA10 mg tlrl-pic
50 mgtlrl-pic-5


*관련된 더 자세한 내용은 첨부된 PDF 파일 및 InvivoGen 홈페이지(클릭)에서 확인하실 수 있습니다.

* 학술 문의   Tel.  031-728-3236    E-mail.  technical@dawinbio.com


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