Antimicrobial ReagentsCell Culture Contamination 에 대한 모든 것


1. 세포를 오염원으로 부터 보호하기

미생물 오염은 가능한 한 조기에 발견이 되어야 합니다. 급속히 퍼지는 mycoplasma, 박테리아, 곰팡이 등의 오염은 세포 자체를 죽이거나 성질을 변형시킴으로써 실험에 투자한 시간, 자원을 낭비하는 결과를 초래하며, 잘못된 결과로 data 해석에 오류를 초래할 수 있습니다. 


미생물 오염원의 근원을 아는 것이 위험을 최소화 하기 위해 가장 중요합니다. 완벽한 예방은 불가능 하지만, 감염을 예방하기 위한 다양한 방법이 있습니다. 

  • 멸균 환경에서 작업, 적절한 무균 기술 사용
  • 취급하는 세포 배양 물질을 오염이 없는 것으로 확인 될 때까지 격리
  • 현미경 혹은 적절한 kit 제품을 사용하여 정기적으로 오염 여부 모니터링
  • 적절한 항생제(cocktail) 사용


2. Mycoplasma 오염

Mycoplasma는 크기가 작고(~ 100nm) 단단한 세포벽이 없기 때문에, 육안 검사로 확인 할 수가 없고 일반적인 filteration을 통과하며 많은 항생제에 내성을 갖습니다. 감염된 host cell의 대사 및 성장 전반의 많은 기능을 변형시켜서 세포 사멸을 초래하게 됩니다. Mycoplasma 오염은 세포 배양에서 주요 문제가 되어, 실험 결과의 유효성 뿐만 아니라 세포 기반 바이오 의약품의 품질 및 안전성에 영향을 미칩니다.


3. Mycoplasma 감염 여부 확인

- PlasmoTest

                

PlasmoTes 제품을 mycoplasma 감염 여부를 확인하는 제품 입니다. InvivoGen 고유의 human TLR2를 안정적으로 발현하는 HEK-Blue 세포가 제품에 포함되어 있고, 감염이 의심되는 media를 이 세포에 배양하게 됩니다. HEK-Blue-2 세포는 mycoplasma lipopeptide의 민감한 센서로써 NF-kB에 의해 유도되는 SEAP(secreted embryonic alkaline phosphatase) reporter gene을 통하여 배지의 색깔 변화로 오염 여부를 판단할 수 있습니다.

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4. Mycoplasma 치료 및 예방

세포 독성 없이 2주만에 치료 완료의 효과를 확인할 수 있습니다.


 - Plasmocin™ treatment

Plasmocin™ treatment는 자주 인용되는 mycoplasma 제거 시약으로 extracellular, intracellular에서 모든 mycoplasma strain에 대해 효과적입니다. Plasmocin™ treatment는 치료 효과를 극대화 시키기 위하여, 단백질 합성을 차단, DNA 복제를 정지시키고, 재 오염을 방지하는 항생제의 mixture 형태로 제공됩니다.

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 - Plasmocure™ (Plasmocin™ treatment 에 내성이 있는 경우에 사용)

세포에 낮은 독성을 보이며, 2주만에 치료 효과를 확인할 수 있습니다. Plasmocure™는 Plasmocin™ treatment에 내성을 갖는 mycoplasma를 제거하는 2차 anti-mycoplasma 시약으로, Plasmocin™ treatment와는 다른 메커니즘을 통해 작용하는 두 가지의 항생제 조합으로 만들어져 있습니다. 대상이 되는 target이 eukaryotic cell에는 존재하지 않기 때문에, 낮은 세포 독성을 나타냅니다.

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- Plasmocin™ prophylactic

Plasmocin™ prophylactic은 mycoplasma를 예방하는 목적으로 사용되는 기본적인 시약으로, Pen-Strep 과 함께 적용할 수 있습니다.

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5. 다양한 미생물 감염 예방 및 치료

-Normocin™

일반적인 세포 대상으로 mycoplasma, bacteria, fungi 감염을 예방할 수 있습니다. Normocin™은 bacteria 감염 보호 범위를 넓히기 위해 penicillin-streptomycin(Pen-Strep) solution과 같이 사용할 수 있습니다. Normocin™은 최소 세포 독성으로 미생물 감염에 대해 최대 방어 역할을 합니다.

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- Primocin™

Primocin™은 primary cell, stem cell 등 예민한 세포를 대상으로 mycoplasma, bacteria, fungi 감염을 예방할 수 있습니다. Mouse와 human-tumor cell line, embryonic cell, iPS cell을 포함한 많은 primary cell 에서 성공적으로 사용이 되고 있습니다.

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- Normocure™

Normocure™는 Gram+과 Gram- bacteria, 특히 Pen-Strep과 Normocin™ 에 내성을 갖는 non-fermenting Gram- bacteria로 부터 세포를 지킬 수 있는 최고의 시약 입니다. 적용 첫 번째 passage 이후, bacteria 감염의 99% 이상이 제거됩니다. 이 항생제들의 target은 eukaryotic cell에는 없는 구조이기 때문에 세포 독성이 낮습니다.

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- Fungin™

 5~10일안에 fungi를 치료할 수 있는 시약으로, 농도를 조절하여 감염 예방 목적으로도 사용할 수 있습니다. Fungin™은 Pen-Strep과 같은 일반적으로 사용되는 항균제와 함께 사용할 수 있고, 널리 사용되는 항진균 시약입니다.

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제품명

사이즈

Cat no.

사용 목적

PlasmoTest™

1 kit (250 samples)

rep-pt1

Mycoplasma 감염 여부 확인

Plasmocin™ treatment

50 mg (2 x 1 ml)

ant-mpt

Mycoplasma 치료

Plasmocure™

100 mg (1 ml)

ant-pc

Mycoplasma 치료(Plasmocin™ treatment 에 내성이 있는 경우에 적용)

Plasmocin™ prophylactic

25 mg (10 x 1 ml)

ant-mpp

Mycoplasma 감염 예방

Normocin™

500 mg (10 x 1 ml)

ant-nr-1

다양한 미생물 감염 예방

1 g (1 x 20 ml)

ant-nr-2

 

Primocin™

500 mg (10 x 1 ml)

ant-pm-1

Primary cell의 다양한 미생물 감염 예방

1 g (1 x 20 ml)

ant-pm-2

 

Normocure™

100 mg (2 x 1 ml)

ant-noc

Bacteria 제거

Fungin™

75 mg (5 x 1.5 ml vial)

ant-fn-1

Fungi 감염원 제거 및 예방

200 mg (1 x 20 ml vial)

ant-fn-2

 


* 학술 문의   Tel. 031-728-3236   E-mail.  technical@dawinbio.com

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