WB 실험을 위한 sample buffer 선택 가이드
Sample buffer 의 역할
- Glycerol : sample 의 밀도를 증가시켜 아래로 가라앉게 만드는 역할을 수행하며 이 외에도 단백질 안정화에 작용한다.
- SDS : sample 을 음전하(-) 를 띄게 만들어준다.
- β-mercaptoethanol: s-s bond (이황화 결합, di-sulfide bond) 를 끊어 준다.
- BPB(Bromophenolblue): indicator 역할을 한다.
Denaturation 이란?
단백질의 3차 구조를 풀어주는 과정
SDS 가 포함된 sample buffer 에 sample 을 넣고 95-100℃ 에서 5분간 끓여준다.
Reduction 이란?
단백질의 di-sulfide bond (이황화 결합) 을 끊어주는 과정
β-mercaptoethanol 또는 DTT 를 포함한 sample buffer 를 사용한다.
Protein 의 상태에 따른 조건 가이드
| Protein state | Gel condition | Loading buffer | Migration buffer |
|---|
| Reduced, denatured | Reducing and denaturing | 2-mercaptoethanol 또는 DTT, SDS 모두 포함 | SDS 포함 |
| Reduced, native | Reducing and native | 2-mercaptoethanol 또는 DTT, SDS 모두 포함 | SDS 포함하지 않음 |
| Oxidized, denatured | Non-reducing and denaturing | 2-mercaptoethanol 또는 DTT 포함하지 않음, SDS 포함 | SDS 포함 |
| Oxidized, native | Non-reducing and native | 2-mercaptoethanol 또는 DTT 포함하지 않음, SDS 포함 | SDS 포함하지 않음 |
GenDEPOT 에서 제공하는 sample buffer 종류
| Product | Description | Cat No. | Size | 국내 재고 |
|---|
Laemmli Sample Buffer(4X), Reducing
(SDS, 2-Mercaptoethanol 모두 포함) | Tris-Hcl(pH 6.8) : 250 mM
SDS : 8 %
Glycerol : 40 %
2-Mercaptoethanol : 8 %
Bromophenol blue : 0.02% | L1100-001 | 10 ml | |
Laemmli Sample Buffer(4X), Non-Reducing
(SDS 포함, 2-Mercaptoethanol 포함하지 않음) | Tris-Hcl(pH 6.8) : 250 mM
SDS : 8 %
Glycerol : 40 %
Bromophenol blue : 0.02% | L1200-001 | 10 ml |  바로 구매
|
Native Sample Buffer (4X)
(SDS, 2-Mercaptoethanol 모두 포함하지 않음)
| Tris-Hcl(pH 6.8) : 250 mM
Glycerol : 40 %
Bromophenol blue : 0.02% | N2300-002 | 20 ml |
|
* SDS 또는 2-Mercaptoethanol 의 포함 여부에 따라 제품 구분
* 제품 문의 Tel. 031-728-3233, E-mail. technical@dawinbio.com
WB 실험을 위한 sample buffer 선택 가이드
Sample buffer 의 역할
- Glycerol : sample 의 밀도를 증가시켜 아래로 가라앉게 만드는 역할을 수행하며 이 외에도 단백질 안정화에 작용한다.
- SDS : sample 을 음전하(-) 를 띄게 만들어준다.
- β-mercaptoethanol: s-s bond (이황화 결합, di-sulfide bond) 를 끊어 준다.
- BPB(Bromophenolblue): indicator 역할을 한다.
Denaturation 이란?
단백질의 3차 구조를 풀어주는 과정
SDS 가 포함된 sample buffer 에 sample 을 넣고 95-100℃ 에서 5분간 끓여준다.
Reduction 이란?
단백질의 di-sulfide bond (이황화 결합) 을 끊어주는 과정
β-mercaptoethanol 또는 DTT 를 포함한 sample buffer 를 사용한다.
Protein 의 상태에 따른 조건 가이드
GenDEPOT 에서 제공하는 sample buffer 종류
(SDS, 2-Mercaptoethanol 모두 포함)
SDS : 8 %
Glycerol : 40 %
2-Mercaptoethanol : 8 %
Bromophenol blue : 0.02%
(SDS 포함, 2-Mercaptoethanol 포함하지 않음)
SDS : 8 %
Glycerol : 40 %
Bromophenol blue : 0.02%
(SDS, 2-Mercaptoethanol 모두 포함하지 않음)
Glycerol : 40 %
Bromophenol blue : 0.02%
* SDS 또는 2-Mercaptoethanol 의 포함 여부에 따라 제품 구분
* 제품 문의 Tel. 031-728-3233, E-mail. technical@dawinbio.com