Antibody isotype에 맞는 agarose를 선택하세요!
 | Puredown Protein A, G, A/G Agarose
- BSA blocking 처리로 non-specific binding 최소화
- Binding capacity가 높고 효율 대비 경제적인 제품
- 별도의 전처리 과정 없이 바로 사용 가능
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IP (Immunoprecipitation) 프로토콜
Sample pre-clearing (Optional)
1. Lysate 또는 media에 1차 antibody의 host species에 맞는 control IgG (~1.0 ug) 와 10 ul의 Puredown Protein Agarose를 넣고 4℃에서 1시간 incubation 한다.
2. 4℃에서 15분 간 2,500 rpm으로 centrifugation 한다.
3. 상등액을 새로운 15 ml conical centrifuge tube에 옮긴다. (ice에서 수행)
4. 상등액 내의 total protein 양을 정량한다.
IP (Immunoprecipitation)
1. 1.5 ml tube에 1 mg의 total protein과 1 ug의 정제된 1차 antibody를 넣고 4℃에서 1시간 incubation 한다. (1차 antibody의 농도는 실험에 맞게 조절)
2. 10 ul의 Puredown Protein Agarose를 넣는다.
3. 1.5 ml tube를 rotating 장비를 이용하여 4℃에서 1시간~overnight 까지 incubation 한다.
4. 4℃에서 15분 간 2,500 rpm으로 centrifugation 한 다음, 조심스럽게 상등액을 버린다.
5. 1 ml의 ice-cold cell lysis buffer 또는 PBS로 pellet을 washing 한다. 4-5 과정을 3번 더 반복한다.
6. 마지막 washing 후에, pellet을 Laemmli sample buffer에 resuspension 시킨 후 5분 간 끓인다. (사용하지 않는 sample은 냉동 보관)
7. 4℃에서 15분 간 2,500 rpm으로 centrifugation 한다.
8. 상등액을 이용하여 SDS-PAGE와 Immunoblot analysis를 진행한다.
Protein Agarose 선택 가이드
| Species | Isotype | Protein A | Protein G | Species | Isotype | Protein A | Protein G |
| Human | IgG1 | +++ | +++ | Chicken | All isotypes | - | ++ |
| IgG2 | +++ | +++ | Cow | All isotypes | ++ | +++ |
| IgG3 | - | +++ | Goat | All isotypes | - | ++ |
| IgG4 | +++ | +++ | Guinea Pig | All isotypes | +++ | ++ |
| IgM | Use anti-Human IgM | Hamster | All isotypes | + | ++ |
| IgE | - | + | Horse | All isotypes | ++ | +++ |
| IgA | - | + | Pig | All isotypes | + | ++ |
| Mouse | IgG1 | + | +++ | Rabbit | All isotypes | +++ | ++ |
| IgG2a | +++ | +++ | Sheep | All isotypes | - | ++ |
| IgG2b | ++ | ++ |
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| IgG3 | + | + |
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| IgM | Use anti-Human IgM |
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| Rat | IgG1 | - | + |
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| IgG2a | - | +++ |
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| IgG2b | - | ++ |
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| IgG2c | + | ++ |
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Ordering information
| Product | Binding capacity | Cat. No. | Size | 국내 재고 |
| Puredown Protein A-Agarose, BSA Blocked | > 35 mg/ml Human IgG | P9201-015 | 1.5 ml |
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| P9201-050 | 5 ml |
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| P9201-100 | 10 ml |
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| P9201-200 | 20 ml |
|
| P9201-400 | 40 ml |
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| Puredown Protein G-Agarose, BSA Blocked | > 18 mg/ml Human IgG | P9202-015 | 1.5 ml |
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| P9202-050 | 5 ml |
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| P9202-100 | 10 ml |
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| P9202-200 | 20 ml |
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| P9202-400 | 40 ml |
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| Puredown Protein A/G-Agarose, BSA Blocked | > 18-35 mg/ml Human IgG | P9203-015 | 1.5 ml |
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| P9203-050 | 5 ml |
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| P9203-100 | 10 ml |
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| P9203-200 | 20 ml |
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| P9203-400 | 40 ml |
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* 제품 Sample test 가능합니다. (Click!)
* 제품 문의 T. 031-728-3235, E. technical@dawinbio.com
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Antibody isotype에 맞는 agarose를 선택하세요!
Puredown Protein A, G, A/G Agarose
IP (Immunoprecipitation) 프로토콜
Sample pre-clearing (Optional)
1. Lysate 또는 media에 1차 antibody의 host species에 맞는 control IgG (~1.0 ug) 와 10 ul의 Puredown Protein Agarose를 넣고 4℃에서 1시간 incubation 한다.
2. 4℃에서 15분 간 2,500 rpm으로 centrifugation 한다.
3. 상등액을 새로운 15 ml conical centrifuge tube에 옮긴다. (ice에서 수행)
4. 상등액 내의 total protein 양을 정량한다.
IP (Immunoprecipitation)
1. 1.5 ml tube에 1 mg의 total protein과 1 ug의 정제된 1차 antibody를 넣고 4℃에서 1시간 incubation 한다. (1차 antibody의 농도는 실험에 맞게 조절)
2. 10 ul의 Puredown Protein Agarose를 넣는다.
3. 1.5 ml tube를 rotating 장비를 이용하여 4℃에서 1시간~overnight 까지 incubation 한다.
4. 4℃에서 15분 간 2,500 rpm으로 centrifugation 한 다음, 조심스럽게 상등액을 버린다.
5. 1 ml의 ice-cold cell lysis buffer 또는 PBS로 pellet을 washing 한다. 4-5 과정을 3번 더 반복한다.
6. 마지막 washing 후에, pellet을 Laemmli sample buffer에 resuspension 시킨 후 5분 간 끓인다. (사용하지 않는 sample은 냉동 보관)
7. 4℃에서 15분 간 2,500 rpm으로 centrifugation 한다.
8. 상등액을 이용하여 SDS-PAGE와 Immunoblot analysis를 진행한다.
Protein Agarose 선택 가이드
Ordering information
* 제품 Sample test 가능합니다. (Click!)
* 제품 문의 T. 031-728-3235, E. technical@dawinbio.com
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